Zastosowanie analizy stripingowej do oznaczania amin biogennych

Źródło finansowania: Narodowe Centrum Nauki

Konkurs: MINIATURA

Podmiot/podmioty realizujący/realizujące: Uniwersytet Przyrodniczy w Lublinie – projekt wyłączny

Kierownik: dr Anna Stępniowska

Nr projektu: 2017/01/X/ST4/01784

Okres realizacji: od 2018-01-25 do 2019-01-24

Wartość: 49 999,00 zł

Streszczenie:

Aminy biogenne to niskocząsteczkowe związki azotowe występujące zarówno w komórkach roślinnych jak i zwierzęcych, niezbędne do prawidłowego funkcjonowania organizmu. Do oznaczania tych związków w materiale biologicznym używane są głównie metody chromatograficzne lub immunoenzymatyczne. Wykonanie oznaczeń tymi metodami wiąże się z bardzo dużymi kosztami. Dlatego ważne jest poszukiwanie nowych metod oznaczania amin biogennych. Jedna z nich jest woltamperometria stripingowa. W metodach woltamperometrycznych używane są głównie roztwory wodne, zawierające sole metali o bardzo niskich stężeniach, dlatego jest to metoda bardziej przyjazna środowisku i stosunkowo tania. W realizowanych badaniach podjęto próbę opracowania procedur oznaczania serotoniny, histaminy, cysteaminy, dopaminy i noradrenaliny na elektrodach błonkowych – błonkowej elektrodzie bizmutowej (BiFE), błonkowej elektrodzie ołowiowej (PbFE) i błonkowej elektrodzie złotej (AuFE). W badaniach wstępnych nie uzyskano sygnałów pochodzących od histaminy, cysteaminy i noradrenaliny. Natomiast uzyskano piki dla serotoniny i dopaminy zarówno na BiFE jak i PbFE. Nie uzyskano sygnału pochodzącego od serotoniny i dopaminy na AuFE. Uzyskane zawartości amin w materiale biologicznym porównano z zawartościami otrzymanymi w wyniku analiz do których wykorzystano powszechnie stosowane testy immunoenzymatyczne. Stwierdzono, że wyniki uzyskane metodą woltamperometryczną są niższe, niż uzyskane z wykorzystaniem metod immunoenzymatycznych. Jest to prawdopodobnie spowodowane stratami analitów podczas etapu przygotowania próbek. Obecne w osoczu krwi białka interferują pomiary woltamperometryczne, natomiast podczas strącania białek może ulec strąceniu również część analitów. Krzywa kalibracyjna dopaminy jest liniowa od 3,06 ng/mL, natomiast wyniki uzyskane za pomocą metod immunoenzymatycznych są ok 10 razy niższe. Dlatego niemożliwe było oznaczenie tej aminy biogennej w próbach osocza za pomocą opracowanej metody woltamperometrycznej.